|
|
مجله دانشگاه علوم پزشکی قم، جلد ۱۲، شماره ۹، صفحات ۴۷-۵۷
|
|
|
| عنوان فارسی |
ایمنی‌زایی آنتی‌ژنN-CfTX-۲ عروس دریایی در موش سوری |
|
| چکیده فارسی مقاله |
زمینه و هدف: عروس دریایی(Chironex fleckeri) ، سمی‌ترین گونه و خطرناک‌ترین موجود دریایی است. CfTX-2 یکی از پروتئین‌های آنتی‌ژنیک زهر عروس دریایی بوده که به‌منظور تحریک سیستم ایمنی، جهت درمان و به‌عنوان کاندید واکسن پیشنهاد شده است. این مطالعه با هدف طراحی، بهینه‌سازی، سنتز و بیان ژن N-CfTX-2 در E. coli و بررسی تولید آنتی‌بادی و ایمنی‌زایی در موش سوری انجام شد. روش بررسی: در این مطالعه تجربی، توالی ژن کامل N-CfTX-2 از NCBI (به شماره AFQ00677.1) به دست آمد. پس از بهینه‌سازی کدونی میزبانE. coli ، سایر بررسی‌های بیوانفورماتیکی لازم برای بیان بهتر ژن؛ از قبیل پایداری پروتئین و ساختار mRNA انجام شد. توالی ژن جهت سنتز و همانندسازی در وکتور pET21a(+) سفارش داده شد. وکتور نوترکیب به‌درون باکتری E. coli BL21 منتقل و بیان پروتئین با IPTG القا گردید. پس از تخلیص پروتئین، آنتی‌ژن حاصل در چهار نوبت به موش‌ها تزریق و میزان آنتی‌بادی تولیدی در سرم آنها اندازه‌گیری شد، سپس آنتی‌بادی تولیدی از سرم موش جداسازی و به‌وسیله تست ELISA تأیید گردید. 60 روز پس از اولین تزریق، حیوانات به‌وسیله زهر Chironex fleckeri چالش شدند. یافته‌ها: توالی ژنی N-CfTX-2 کلون‌شده در وکتور بیانی pET21a(+) به‌وسیله PCR و پروتئین نوترکیب تولیدشده به‌وسیله SDS-PAGE و لکه‌گذاری وسترن تأیید گردید. همچنین موش‌های ایمن‌شده 50 برابر LD50، زهر عروس دریایی را تحمل کردند. نتیجه‌گیری: با توجه به خاصیت آنتی‌ژنی N-CfTX-2 و تولید آنتی‌بادی در حیوان آزمایشگاهی، می‌توان از این پروتئین در مطالعات آتی به‌عنوان یک کاندید واکسن استفاده کرد. |
|
| کلیدواژه‌های فارسی مقاله |
عروس دریایی، سیستم ایمنی، توکسین 2 |
|
| عنوان انگلیسی |
Immunogenicity of N-CfTX-2 Antigen of Chironex fleckeri Jellyfish in Mice |
|
| چکیده انگلیسی مقاله |
Background and Objectives: Chironex. fleckeri is the most toxic and dangerous marine species. CfTX-2 is one of the antigenic proteins of jellyfish venom that has been suggested for stimulation of the immune system, for treatment, and as a candidate for vaccine. The purpose of this study was designing, optimization, synthesis, and expression of the N-CfTX-2 gene in E. coli and investigation of the production of antibodies and immunization in mice. Methods: In this experimental study, the complete sequence of N-CfTX-2 gene was obtained from NCBI (with accession number AFQ00677.1). After optimizing the codon of E. coli host, other bioinformatics studies needed for better gene expression were performed, such as protein stability and mRNA structure. The gene sequence was ordered for synthesis and replication in the pET21a (+) vector. The recombinant vector was transformed into E. coli BL21 and protein expression was induced by IPTG. After purification of the protein, the obtained antigen was injected into the mice in four steps and the amount of antibody produced in their serum, was measured. Then, the produced antibody was isolated from the serum and confirmed by ELISA assay. Sixty days after the first injection, the mice were challenged by the Chironex fleckeri jellyfish venom. Results: The N-CfTX-2 gene sequence cloned in the expression vector pET21a (+) was confirmed by PCR, and the produced recombinant protein was confirmed by SDS-PAGE and Western blot. Moreover, the immunized mice tolerated jellyfish venom 50 x LD50. Given the antigenic properties of N-CfTX-2 and antibody production in laboratory animal, this protein can be used as a vaccine candidate in future studies. |
|
| کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله |
Chironex fleckeri, Immune system, Toxin 2 |
|
| نویسندگان مقاله |
حسین هنری | Hossein Honari
Biology Research Center, Faculty of Sciences, Imam Hossein University
مرکز تحقیقات زیست‌شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه جامع امام‌حسین(ع)
سید مجتبی آقایی | Seyed mojtaba Aghaie
Biology Research Center, Faculty of Sciences, Imam Hossein University
مرکز تحقیقات زیست‌شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه جامع امام‌حسین(ع)
حامد جلیل‌پور | Hamed Jalilpour
Biology Research Center, Faculty of Sciences, Imam Hossein University
مرکز تحقیقات زیست‌شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه جامع امام‌حسین(ع)
|
|
| نشانی اینترنتی |
http://journal.muq.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1360-1&slc_lang=fa&sid=1 |
| فایل مقاله |
اشکال در دسترسی به فایل - ./files/site1/rds_journals/70/article-70-1057082.pdf |
| کد مقاله (doi) |
|
| زبان مقاله منتشر شده |
fa |
| موضوعات مقاله منتشر شده |
سلولی و مولکولی |
| نوع مقاله منتشر شده |
مقاله پژوهشی |
|
|
|
برگشت به:
صفحه اول پایگاه |
نسخه مرتبط |
نشریه مرتبط |
فهرست نشریات
|