|
|
مجله دانشگاه علوم پزشکی قم، جلد ۱۲، شماره ۱۲، صفحات ۴۲-۵۲
|
|
|
| عنوان فارسی |
زیرهمسانهسازی و بیان ژن ممزوجی ML۱-stxB دارواش در E. Coli و تولید آنتی‌بادی آن در موش سوری |
|
| چکیده فارسی مقاله |
زمینه و هدف: عصاره برگ‌های دارواش (Viscum album L) دارای پروتئین MLI از نوع RIP2 (پروتئین‌های غیرفعال ریبوزومی تیپ 2) با خواص لکتینی هستند. STxB شیگا توکسین به‌عنوان یک ایمونواجوانت و حامل، مطرح بوده و به گیرنده سطح سلولی خود به‌نام Gb3 متصل می‌گردد که روی اکثر سلول‌های بدن بیان می‌شود. در این مطالعه، بیان آنتی‌ژنML1-stxB در E. coli و تولید آنتی‌بادی آن در موش سوری بررسی گردید. روش بررسی: در این مطالعه تجربی، پلاسمید pUC57 حاوی ژن MLI با جایگاه‌های آنزیمی NdeI و SalI در وکتور بیانی pET28a(+)-stxB، زیرهمسانهسازی شد و به باکتری E. coli سویه BL21(DE3) تراریخت (ترانسفورم) گردید. بیان کاست ژنی MLI-StxB تحت القایIPTG انجام گرفت. پس از تخلیص، پروتئین نوترکیب MLI-STxB به‌وسیله ستون نیکل کروماتوگرافی در چهار نوبت متوالی به موش‌های سوری تزریق شد. یافته‌ها: در این مطالعه، ژن ML1-stxB کلون‌شده در وکتور بیانی pET28a(+)، با واکنش PCR و آنالیز آنزیمی تأیید گردید. همچنین پروتئین نوترکیب تولیدشده به‌وسیله SDS-PAGE و لکه‌گذاری وسترن مورد تأیید قرار گرفت، سپس آنتی‌بادی تولیدشده از سرم موش جداسازی و با روش تست ELISA بررسی گردید. نتیجه‌گیری: براساس نتایج این مطالعه، پروتئین ML1 دارای خاصیت غیرفعال‌کننده ریبوزومی و STxB نقش یاوری و حاملی دارد؛ لذا این پروتئین نوترکیب، کاندیدای واکسن علیه سم دارواش شیگلا دیسانتری بوده که از آنتی‌بادی آن می‌توان به‌عنوان شناساگر استفاده کرد. |
|
| کلیدواژه‌های فارسی مقاله |
اشرشیاکلی، زیرهمسانه سازی، دارواش، شیگلا. |
|
| عنوان انگلیسی |
Subcloning and Expression of ML1-stxB Fusion Gene of Mistletoe Lectin in E. coli and Production of its Antibody in Mouse |
|
| چکیده انگلیسی مقاله |
Background and Objectives: Extract of mistletoe lectin (Viscum album L) leaves contains MLI protein that is a type 2 ribosome-inactivating protein (RIP2) with lectin properties. Shiga toxin (STxB) has been considered as an immunoadjuvant and carrier, which binds to its cell surface receptor, Gb3, that is expressed on most of the body cells. In this study, the expression of ML1-stxB antigen and production of its antibody, were investigated in mouse. Methods: In this experimental study, ML1 gene containing pUC57 plasmid with enzymes sites of NdeI and SalI, was subcloned in the pET28a(+)-stxB expression vector, and then was transformed into E. coli BL21 (DE3). The expression of ML1-stxB gene cassette was induced by IPTG. After purification, the MLI–STxB recombinant protein was purified by nickel affinity chromatography and injected into mice four times. Results: In this study, the cloned ML1-stxB gene in expression vector of pET28a(+) was confirmed by PCR and enzyme analysis. The produced recombinant protein were confirmed by SDS-PAGE and Western blotting. Then, the produced antibody was isolated from the serum of mouse and investigated using ELISA method. Conclusion: According to this study, ML1 protein has ribosome inactivating property and STxB has adjuvant and carrier functions, therefore,this recombinant protein can be a candidate vaccine against ML-1 toxin of Shigella dysentery, which its antibody can be used as identifier. |
|
| کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله |
|
|
| نویسندگان مقاله |
سهیلا رهنمایی یحیی آبادی | Soheila Rahnamaei Yahyaabadi.
Payame Noor University
دانشگاه پیام نور
حسین هنری | Hossein Honari
Department of Biology, Faculty of Basic Sciences, Imam Hossein University
گروه زیست‌شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه جامع امام‌حسین(ع)
مسعود عبدالهی | Masoud Abdollahi
Department of Biology, Faculty of Basic Sciences, Imam Hossein University
گروه زیست‌شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه جامع امام‌حسین(ع)
سید مجتبی آقایی | Seyed Mojtaba Aghaie
Department of Biology, Faculty of Basic Sciences, Imam Hossein University
گروه زیست‌شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه جامع امام‌حسین(ع)
محمد علی ابراهیمی | Mohamadali Ebrahimi
Payame Noor University
دانشگاه پیام نور
|
|
| نشانی اینترنتی |
http://journal.muq.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1190-1&slc_lang=fa&sid=1 |
| فایل مقاله |
اشکال در دسترسی به فایل - ./files/site1/rds_journals/70/article-70-1272067.pdf |
| کد مقاله (doi) |
|
| زبان مقاله منتشر شده |
fa |
| موضوعات مقاله منتشر شده |
ژنتیک |
| نوع مقاله منتشر شده |
مقاله پژوهشی |
|
|
|
برگشت به:
صفحه اول پایگاه |
نسخه مرتبط |
نشریه مرتبط |
فهرست نشریات
|