|
|
، جلد ۱۱، شماره ۲، صفحات ۱۲۵-۱۳۳
|
|
|
| عنوان فارسی |
همسانه‌سازی و بیان بالای انترفرن گامای گاوی در یاخته‌های اوکاریوتی (COS-۷) |
|
| چکیده فارسی مقاله |
انترفرن گاما یکی از سیتوکین‌های کلیدی در تعیین پاسخ ایمنی وابسته به سلول‌هایT کمکی نوع یک است. در این مطالعه از بافت طحال گاو RNA تام استخراج گردید و به کمک روش RT-PCR ژن انترفرن گامای گاوی همسانه‌سازی شد. cDNA ژن انترفرن گاما به ناقل بیانی پستانداری pcDNA3.1(+) که تحت کنترل پیش برنده سیتومگالوویروس انسانی (CMV) است، انتقال یافت. پس از تعیین توالی ژن مشخص شد که ردیف اسید آمینه‌های این پروتئین با ردیف‌های گزارش شده در پایگاه اطلاعات ژنتیکی برای گاو (100%)، گوسفند (95%)، بز (95%)، شتر (86%)، لاما (83%)، اسب (77%)، سگ (75%)، گربه (75%)، انسان (61%)، موش (44%) و مرغ (35%) شباهت دارد. بیان ژن انترفرن گامای گاوی نو ترکیب در شرایط آزمایشگاهی با انجام آزمون الیزا تایید گردید. حداکثر بیان ژن در زمان‌های 96 و 144 ساعت بعد از ترانسفکشن در مایع رویی سلول‌های رده اپتلیال کلیه میمون (COS-7) بود. نتایج نشان می‌دهد که ناقل بیانی pcDNA3.1(+) و سلول‌های COS-7 ترانسفکت شده با روش دی اتیل آمینواتیل دکستران (DEAE) اجازه بیان ژن انترفرن گاما را داده و این پروتئین در مایع رویی کشت سلولی به خوبی ترشح می‌شود. |
|
| کلیدواژه‌های فارسی مقاله |
انترفرن گاما، گاو، همسانه‌سازی، COS-7، |
|
| عنوان انگلیسی |
Cloning and high level expression of bovine interferon gamma gene in eukaryotic cells (COS-7) |
|
| چکیده انگلیسی مقاله |
Interferon gamma (IFN-γ) is one of the key cytokines in defining T helper 1 lymphocyte immuneresponses. In this study, the bovine IFN-γ gene was cloned from spleen tissue RNA using the reversetranscription-polymerase chain reaction (RT-PCR). IFN-γ cDNA was sub-cloned and expressed inmammalian expression plasmid (pcDNA3.1(+)) under the control of the human cytomegalovirus (CMV)promoter. The predicted amino acid (aa) sequence of bovine IFN-γ compared with corresponding knownsequence from bovine (Bos taurus) was 100% identity and with ovine, caprine, camel, lama, equine, canine,feline, human, mice and chicken cytokine was 95, 95, 86, 83, 77, 75, 75, 61, 44 and 35%, respectively. Invitro expression of recombinant bovine IFN-γ (rBoIFN-γ) and secretion to culture medium was confirmed by ELISA test. Maximum expression of rBoIFN-γ occurred at 96 and 144 h after transfection in COS-7 cells.These results showed that pcDNA3.1 expression vector and COS-7 cells transfected by diethylaminoethyl(DEAE)-dextran allowed the high level expression of bovine IFN-γ gene and the release of protein insupernatant of cell culture. |
|
| کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله |
Interferon gamma, Bovine, cloning, COS-7 |
|
| نویسندگان مقاله |
سید امیرحسین جلالی | s a h
ph.d. student in biotechnology, department of pathobiology, faculty of veterinary medicine, university of tehran, tehran, iran
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تهران (Tehran university)
gh نیکبخت بروجنی | nikbakht brujeni
department of pathobiology, faculty of veterinary medicine, university of tehran, tehran, iran
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تهران (Tehran university)
h تاجبخش |
fellow member of academy of science of iran, tehran, iran
محمدکاظم کوهی | m k
department of basic sciences, faculty of veterinary medicine, university of tehran, tehran, iran
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تهران (Tehran university)
m gholkar |
department of parasitology, pasteur institute, tehran, iran
سازمان اصلی تایید شده: انستیتو پاستور ایران (Pasteur institute of iran)
m ربانی |
department of biotechnology, faculty of sciences, university of isfahan, isfahan, iran
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه اصفهان (Isfahan university)
|
|
| نشانی اینترنتی |
http://ijvr.shirazu.ac.ir/article_149_1029bbe6612598c9712896a21495d6ca.pdf |
| فایل مقاله |
فایلی برای مقاله ذخیره نشده است |
| کد مقاله (doi) |
|
| زبان مقاله منتشر شده |
fa |
| موضوعات مقاله منتشر شده |
|
| نوع مقاله منتشر شده |
|
|
|
|
برگشت به:
صفحه اول پایگاه |
نسخه مرتبط |
نشریه مرتبط |
فهرست نشریات
|