، جلد ۱۶، شماره ۴، صفحات ۸۳-۹۳
عنوان فارسی ایمنی زایی خوکچه هندی با پروتئین نوترکیب IpaD-StxB
چکیده فارسی مقاله زمینه و هدف: شیگلوزیس یک مسئله جهانی مهم برای سلامتی بشر محسوب شده و تا به امروز واکسن موثری علیه شیگلا یافت نشده است. یکی از مهم‎ترین فاکتورهای بیماری‌زای اصلی در شیگلا دیسانتری تیپ 1، انتروتوکسین شیگلا یا STx می‌باشد. STxB دارای نقش ایمنی زایی، ادجوانتی و حاملی بوده و می‌توان با ممزوج کردن آنتی ژن‎های کاندیدای واکسن با این ادجوانت به تولید واکسن مناسب پرداخت. پروتئین IpaD نقش مهم و کلیدی در تهاجم، بیماری‎زایی و ایجاد عفونت توسط شیگلا دارد. مواد و روش‌ها: در این مطالعه تجربی، توالی ژنی ipaD و stxB از بانک ژنی استخراج و به صورت صناعی تهیه گردید و با انتقال این ژن به درون باکتری E. coli BL21 DE3، به‎وسیله PCRو برش آنزیمی تایید و میزان بیان پروتئین مذکور مورد ارزیابی و با استفاده از تکنیک وسترن بلات، بیان آن مورد تایید قرار گرفت. بعد از تخلیص پروتئین نوترکیب با ستون کروماتوگرافی، چهار نوبت متوالی به خوکچه هندی تزریق شد و ایمنی‎زایی آن با استفاده از باکتری شیگلا فلکسنری 2a و سم فعال O157:H7 E.coli مورد ارزیابی قرار گرفت. یافته‌ها: نتایج چالش نشان داد که خوکچه‎های هندی ایمن شده توانستند 28 برابر LD50 شیگا توکسین E. coli O157:H7 را تحمل نمایند. در ضمن، چالش خوکچه‎ها توسط القای باکتری شیگلا فلکسنری در چشم نیز انجام شد که نتیجه آن حاکی از ابتلای خوکچه‎های شاهد به آب مروارید(کاتاراکت) و سالم ماندن خوکچه‎های ایمن شده بود. نتیجه‎گیری: نتایج به‎ دست آمده از این تحقیق بیان‎گر آن است که پروتئین حاصل از امتزاج ژن‎های ipaD و stxB، می‎تواند کاندیدای مناسبی جهت تولید واکسن نوترکیب علیه انواع شیگلا باشد.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله
عنوان انگلیسی Immunogenicity in Guinea Pigs by IpaD-STxB Recombinant Protein
چکیده انگلیسی مقاله Background: Shigellosis is a major global issue of human health. To date, no effective vaccine has been found against Shigella. One of the major virulent factors in Shigella dysenteriae type 1 is Shigella enterotoxin or STx. STxB has immunogenic, adjuvant, or carrier properties. Vaccine candidate antigens can be coupled with this adjuvant for production of an appropriate vaccine. IpaD has a key role in invasion, virulence, and infection by Shigella. Materials and Methods: In this study, the gene sequences of STXB and ipaD were obtained from gene bank and corresponding genes were prepared as synthetic construct and then transferred to E. coli BL21DE3. By PCR amplification and enzymatic digestion, protein expression levels were assessed. Its protein expression was confirmed by Western blot technique. After extraction by affinity chromatography, the recombinant protein was injected four times to guinea pigs. The pigs were, then, challenged by Shigella felexneri 2a and active toxin of E. coli O157:H7. Results: The results showed that groups of guinea pigs challenged with 28×LD50 of toxin completely survived. Furthermore, guinea pigs were challenged by inducing Shigella felexneri 2a in their eyes. The results showed that the control pigs got cataracts, whereas the immune pigs were in health. Conclusion: The findings of this study suggest that this recombinant protein is a good candidate for production of a recombinant vaccine against Shigella family.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله حسین هنری | Hosein Honari
Department of Biology, Faculty of Basic Science, Imam Hossein University, Tehran, Iran
گروه زیست شناسی، دانشگاه جامع امام حسین(ع)، تهران، ایران

ایمان املشی | Iman Amlashi
Department of Biology, Faculty of Basic Science, Imam Hossein University, Tehran, Iran
گروه زیست شناسی، دانشگاه جامع امام حسین(ع)، تهران، ایران

محمد ابراهیم مینایی | Mohammad Ebrahim Minaee
Department of Biology, Faculty of Basic Science, Imam Hossein University, Tehran, Iran
گروه زیست شناسی، دانشگاه جامع امام حسین(ع)، تهران، ایران

صادق صفایی | Sadegh Safaee
Department of Biology, Faculty of Basic Science, Imam Hossein University, Tehran, Iran
گروه زیست شناسی، دانشگاه جامع امام حسین(ع)، تهران، ایران

نشانی اینترنتی http://jams.arakmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-2170-1&slc_lang=fa&sid=1
فایل مقاله اشکال در دسترسی به فایل - ./files/site1/rds_journals/2736/article-2736-2049021.pdf
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده علوم پایه
نوع مقاله منتشر شده پژوهشی اصیل
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات