|
|
مجله دانشگاه علوم پزشکی قم، جلد ۹، شماره ۷، صفحات ۱-۱۰
|
|
|
| عنوان فارسی |
همسان‌سازی و بیان نوترکیب دُمین انتهای کربوکسیل پروتئین اینتیمین پاتوژن EHEC در باکتری اشرشیا کلی سویه BL۲۱(DE۳) |
|
| چکیده فارسی مقاله |
چکیده زمینه و هدف: بخشی از عفونت‌های روده‌ای به‌واسطه پاتوژن‌هایی به‌وجود می‌آ‌یند که با مصرف مواد غذایی آلوده وارد سیستم گوارش انسان می‌شوند. در لانه‌گزینی باکتری E. coli O157:H7 در روده بزرگ مجموعه‌ای از پروتئین‌ها که برخی از آنها شروع‌کننده این فرآیند بوده و فقدان آنها مانع از این پدیده می‌شود، دخیل هستند. هدف از انجام این پژوهش همسان‌سازی و بیان نوترکیب پلی‌پپتید انتهای کربوکسیل پروتئین اینتیمین به طول 311 اسید آمینه به‌عنوان کاندید واکسن علیه E. coli O157:H7 بوده است. . روش بررسی: طراحی پرایمر اختصاصی برای ژن eae با استفاده از نرم‌افزارOligo نسخه 7 انجام شد و تکثیر ژن به‌وسیله واکنش PCR از روی DNA الگو صورت گرفت. واکنش‌های هضم آنزیمی و الحاق ژن، درون وکتور pET28a(+) انجام شد. پس از تأیید همسان‌سازی ژن، بیان نوترکیب پروتئین اینتیمین با استفاده از القاگر IPTG صورت گرفت. برای تأیید پروتئین اینتیمین، آنالیز وسترن بلات انجام شد. یافته‌ها: همسان‌سازی ژن eae درون وکتور pET28a(+) به شکل مناسب بین جایگاه‌های مطلوب انجام شد و پروتئین اینتیمین پس از القا، بیان نوترکیب مناسب و قابل‌توجهی را نشان داد. آنتی‌بادی مورد استفاده در وسترن بلات نیز توانست به شکل مناسبی اینتیمین را شناسایی کند. نتیجه‌گیری: در این مطالعه، سازه پایدار محتوی ژن eae ساخته شد که بیان نوترکیب قابل‌توجهی از پروتئین اینتیمین را از خود نشان داد. بنابراین، این سازه را می‌توان برای تولید پروتئین اینتیمین جهت مطالعات ایمنی‌زایی علیه E. coli O157:H7 به‌کار برد. |
|
| کلیدواژه‌های فارسی مقاله |
|
|
| عنوان انگلیسی |
Cloning and Recombinant Expression of Intimin C-Terminal Domain of EHEC Pathogen in E. coli BL21(DE3) Strain |
|
| چکیده انگلیسی مقاله |
Abstract Background and Objectives: Some intestinal infections are caused by pathogens that enter the gastrointestinal tract of humans by consumption of contaminated food. A set of proteins are involved in colonization of E. coli O157:H7 in the large intestine, some of which initiate this phenomenon and their absence prevents it. The aim of this study was cloning and recombinant expression of C-terminal polypeptide of intimin, with a length of 300 amino acids, as a vaccine candidate against E. coli O157:H7. Methods: Specific primers for eae gene were designed using Oligo software version 7.0 and gene amplification was performed by PCR from template DNA. Enzymatic digestion and gene ligation were performed in pET28a(+) vector. Recombinant expression of intimin was done by IPTG inducer following the cloning confirmation. Western blotting analysis was performed to confirm the intimin protein. Results: Cloning of eae gene in the pET28a (+) vector was performed appropriately among desired sites, and intimin protein had a proper and significant recombinant expression after the induction. Also, the antibody used in western blotting could identify intimin. Conclusion: In this study, a stable construct containing eae gene was synthetized, which showed an appropriate recombinant expression of intimin protein. Therefore, this construct can be used to produce intimin protein for immunization studies against E. coli O157:H7. |
|
| کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله |
|
|
| نویسندگان مقاله |
مصطفی بخشی | mostafa bakhshi
imam hossein university
دانشگاه امام حسین ع
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه جامع امام حسین (Imam hosseyn university)
فیروز ابراهیمی | firouz ebrahimi
imam hossein university
دانشگاه امام حسین ع
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه جامع امام حسین (Imam hosseyn university)
وحیده شیخ زاده | vahide sheikhzade
islamic azad university, quchan
دانشگاه آزاد اسلامی واحد قوچان
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه آزاد اسلامی قوچان (Islamic azad university of ghoochan)
|
|
| نشانی اینترنتی |
http://journal.muq.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-30&slc_lang=fa&sid=fa |
| فایل مقاله |
فایلی برای مقاله ذخیره نشده است |
| کد مقاله (doi) |
|
| زبان مقاله منتشر شده |
fa |
| موضوعات مقاله منتشر شده |
|
| نوع مقاله منتشر شده |
مقاله پژوهشی |
|
|
|
برگشت به:
صفحه اول پایگاه |
نسخه مرتبط |
نشریه مرتبط |
فهرست نشریات
|