|
|
Iranian Journal of Veterinary Medicine، جلد ۸، شماره ۳، صفحات ۱۸۷-۱۹۲
|
|
|
| عنوان فارسی |
ساخت وکتور نوترکیب برای ایجاد جهش هدفمند در سالمونلا تیفی موریوم |
|
| چکیده فارسی مقاله |
دربین همه تکنیک های رایج برای جهش زایی هدفمند سیستم λ Red recombinase به طور گسترده ای برای غیرفعال کردن ژن های کروموزومی در باکتری ها استفاده شده است. در این روش همیشه خطر تجزیهDNA خطی وارد شده توسط آنزیم های محدود الاثر وجود دارد که سبب کاهش فرکانس نوترکیبی می شود. برای رفع این مشکل ما یک وکتور نوترکیب برای غیرفعال کردن ژن phoP در سالمونلا تیفی موریوم ساختیم. به منظور ساخت این وکتور از SOEing PCR و آنزیم های محدودالاثر استفاده شد. پلاسمید حاصل،pTAAZ92، حاوی یک کاست کانامایسین با دو بازوی طویل هومولوگ مجاور ژنphoP می باشد. با الکتروپوریشن pTAAZ92 به سالمونلا تیفی موریوم کاست کانامایسین از طریق نوترکیبی همولوگ جایگزین ژن phoP می شود. با توجه به هومولوژی زیاد ژن phoP در بسیاری از گونه های سالمونلا می توان از این پلاسمید برای حذف ژن phoP در اکثر این گونه ها استفاده نمود. |
|
| کلیدواژه‌های فارسی مقاله |
|
|
| عنوان انگلیسی |
Construction of a recombinant vector for site-directed mutagenesis in Salmonella typhimurium |
|
| چکیده انگلیسی مقاله |
BACKGROUND: Among all common techniques in sitedirectedmutagenesis, λ Red recombinase system has beenwidely used to knock out chromosomal genes in bacteria. In thismethod, there is always the risk of DNA Linear digestion byhost's restriction enzymes that leads to the low frequency ofrecombination. OBJECTIVES:To overcome this, we constructeda recombinant vector to disrupt phoP gene in Salmonellatyphimurium. METHODS: The SOEing PCR method andrestriction enzymes were used to construct the vector. RESULTS:The resulting plasmid, pTAAZ92, contains a Kanamycincassette with two long homologous arms flanking of the phoPgene. CONCLUSIONS: After electrotransformation of thepTAAZ92 into the Salmonella typhimurium , the phoP gene isreplaced by the Kanamycin cassette through homologousrecombination. According to the high homology of the phoPgene in many of Salmonella species the pTAAZ92 can be used todisrupt the phoP gene in most of these species. |
|
| کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله |
|
|
| نویسندگان مقاله |
آنیا آهنی آذری | ahani azari
department of microbiology, faculty of veterinary medicine, university of tehran, tehran, iran
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تهران (Tehran university)
تقی زهرایی صالحی | zahraei salehi
department of microbiology, faculty of veterinary medicine, university of tehran, tehran, iran
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تهران (Tehran university)
بهار نیری فسایی | nayeri fasaei
department of microbiology, faculty of veterinary medicine, university of tehran, tehran, iran
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تهران (Tehran university)
امید مددگار |
department of microbiology, faculty of veterinary medicine, university of tehran, tehran, iran
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تهران (Tehran university)
مسعود آل بویه |
bacis and molecular epidemiology of gastrointestinal disorders research center, shahid beheshti university of medical sciences, tehran, iran
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی (Shahid beheshti university of medical sciences)
|
|
| نشانی اینترنتی |
http://ijvm.ut.ac.ir/article_51890_021e359a1bd6b0aa06552f2ef8848997.pdf |
| فایل مقاله |
فایلی برای مقاله ذخیره نشده است |
| کد مقاله (doi) |
|
| زبان مقاله منتشر شده |
fa |
| موضوعات مقاله منتشر شده |
|
| نوع مقاله منتشر شده |
|
|
|
|
برگشت به:
صفحه اول پایگاه |
نسخه مرتبط |
نشریه مرتبط |
فهرست نشریات
|