، جلد ۱۶، شماره ۷، صفحات ۳۵-۴۴
عنوان فارسی تولید پروتئین نوترکیب CagA هلیکوباکتر پیلوری
چکیده فارسی مقاله زمینه و هدف: هلیکوباکتر پیلوری باسیلی گرم منفی است که موجب بیماری های معده و دئودنوم در انسان میشود. از مهمترین ژنهای مرتبط با بیماری زایی این باکتری ژن CagA میباشد که موجب کلونیزاسیون بیشتر آن در سلولهای اپی تلیال معده و ایجاد التهاب و زخم های گوارشی میگردد. در این تحقیق سعی گردید تا تولید پروتئین نوترکیب حاوی ناحیه دارای بالاترین خاصیت آنتی ژنیک CagA در باکتری E. coli انجام گیرد. مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی، قطعه حاوی ناحیه آنتی ژنیک ژن CagA به طول 1245 جفت باز براساس برنامه های بیوانفورماتیکی بدست آمد، با روش PCR تکثیر، با آنزیمهای محدود کننده BamHI و XhoI برش و در پلاسمید pET32a کلون و در E. coli BL21 (DE3) pLysS با القا توسط IPTGبیان شد. از کیت Ni-NTA جهت تخلیص پروتئین بیان شده استفاده شد و آنتی ژنیسیته آن به روش لکه گذاری وسترن بررسی گردید. یافته ها: نتایج حاکی از کلونینگ و بیان موفقیت آمیز ژن هدف بود. با استفاده از کیت Ni-NTAو دیالیز تخلیص پروتئین CagA نوترکیب با غلظت 5/1 میلی گرم بر میلی لیتر انجام شد. در وسترن بلاتینگ پروتئین تولید شده با سرم های آلوده انسان و موش واکنش نشان داد. نتیجه گیری: نتایج نشان داد که پروتئین نوترکیب CagA (65 کیلو دالتون) آنتی ژنیسیته خود را حفظ می کند. بنابراین میتواند برای تشخیص سرولوژیک بیماری های هلیکوباکتر پیلوری و تولید واکسن مورد استفاده قرار گیرد.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله کلونینگ، پروتئین CagA، هلیکوباکتر پیلوری، پروتئین نوترکیب
عنوان انگلیسی Production of Recombinant CagA Protein of Helicobacter Pylori
چکیده انگلیسی مقاله Background: Helicobacter pylori (H. pylori) is a gram negative bacilli that causes the stomach and duodenum diseases in human. An important virulence factor of H. pylori is a CagA gene that increases of colonization it in stomach epithelial cells and lead to inflammation and peptic ulcers. The aim of the present study was to production of recombinant protein containing highly antigenic region of CagA in E. coli. Materials and Methods: In this experimental study, the antigenic region (1245 base pair) of CagA gene was detected by bioinformatics methods, proliferated by PCR method, digested by BamHI and XhoI restriction enzymes and cloned into pET32a plasmid and was expressed in the E. coli BL21 (DE3) pLysS with induced by IPTG. The expressed protein was purified with Ni-NTA kit and its antigenicity was studied by western blotting method. Results: Data showed the successful cloning and expression of the target gene. Recombinant CagA protein purified by Ni-NTA kit and dialysis with concentration of 1.5 mg/ml. In western blotting, the produced protein was interacted with infected human and mice sera. Conclusion: Results indicated that recombinant CagA protein (65 KDa) maintains its antigenicity, so could be used for serological diagnosis of H. pylori diseases and production of vaccine.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله وحیده فرجادی | Vahideh Farjadi
1- Department of Microbiology, Islamic Azad University, Qom Branch, Qom, Iran
گروه میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد قم، قم، ایران

حمید ابطحی | Hamid Abtahi
2- Department of Microbiology, Molecular and Medicine Research Center, Arak University of Medical Sciences, Arak, Iran
مرکز تحقیقات پزشکی و مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی اراک، اراک، ایران

محمدرضا ذوالفقاری | Mohammad Reza Zolfaghari
1- Department of Microbiology, Islamic Azad University, Qom Branch, Qom, Iran
گروه میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد قم، قم، ایران

صفیه صوفیان | Safieh Soufian
3- Department of Biology, Payame Noor University, Arak, Iran
گروه بیولوژی، دانشگاه پیام نور، اراک، ایران

لیلا حسن زاده | Leila Hasanzadeh
4- Department of Biotechnology and Microbiology, Arak University of Medical Sciences, Arak, Iran
گروه بیوتکنولوژی و میکروبیولوژی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اراک، اراک، ایران

نشانی اینترنتی http://jams.arakmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-2299-1&slc_lang=fa&sid=1
فایل مقاله اشکال در دسترسی به فایل - ./files/site1/rds_journals/2736/article-2736-2048986.pdf
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده علوم پایه
نوع مقاله منتشر شده پژوهشی اصیل
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات