|
|
، جلد ۱۰، شماره ۳، صفحات ۲۰-۳۰
|
|
|
| عنوان فارسی |
جداسازی ژن اینترفرون گامای بابون زیتونی و طراحی سیستمی نیمه کمّی بر اساس PCR رقابتی جهت سنجش بیان این ژن |
|
| چکیده فارسی مقاله |
زمینه و هدف: سالیان متمادی است که از پریمات‌ها به عنوان نزدیکترین مدل‌های حیوانی برای بررسی بیماریها، داروها و واکسن‌های انسانی استفاده می‌شود. پریمات‌ها همچنین میزبان طبیعی رتروویروس‌های خانواده STLV/HTLV هستند که از این خانواده HTLV-I یکی از مشکلات بهداشتی استان خراسان نیز می‌باشد. اخیراً در بابون زیتونی، ویروسی بسیار نزدیک به HTLV-I یافت شده که آن را به عنوان مدلی ایده‌آل برای مطالعات درمانی این بیماری مطرح نموده است. ابداع روشهایی جهت ارزیابی سایتوکاین‌های این حیوان، بویژه اینترفرون گاما، اولویت بالایی برای چنین مطالعاتی دارد. روش بررسی: در این مطالعه چگونگی جداسازی cDNA اینترفرون گاما از سلول‌های خون محیطی، مقایسه توالی ژنی آن با انسان و سایر پریمات‌ها، ساختن پلاسمیدهای رقابتی و بالاخره چگونگی سنجش بیان این سایتوکاین مورد بررسی قرار گرفت. به منظور استاندارد کردن نتایج اندازه گیریها در این روش نیاز به اندازه‌گیری بیان یک ژن خانگی نیز بود؛ به همین دلیل پلاسمیدی رقابتی برای سنجش بیان ژن گلیسر آلدئید 3 فسفات دهیدروژناز (G3PDH) نیز ساخته شد. یافته‌ها :دو توالی جدید مربوط به اینترفرون گاما و G3PDH این بابون در بانک ژن NCBI ثبت گردید. نتایج PCR رقابتی و تحلیل نتایج الکتروفورز یک نمونه از سلول‌های تک هسته‌ای خون محیطی این بابون نشان‌دهنده 7pg cDNA اینترفرون گاما در برابر 0.455pg از G3PDH بود. نتیجه‌گیری: با وجود پاره‌ای تفاوتها بین انترفرون گامای بابون و انسان، ساختار هر دو بسیار مشابه به نظر می‌رسد. بر اساس روش ارائه شده در این پژوهش، می‌توان نسبت بیان انترفرون گاما به G3PDH را برای مقایسه بیان انترفرون گاما بین نمونه‌های مختلف به کار برد. |
|
| کلیدواژه‌های فارسی مقاله |
|
|
| عنوان انگلیسی |
Isolation of IFN- gamma gene from olive baboon and designed semi-quantitative competitive PCR method to quantify gene expression |
|
| چکیده انگلیسی مقاله |
Background and Aim: Primates have long been used as the most resembling animal model to human. Primates are natural hosts of HTLV/STLV retroviruses. From this family, HTLV-I is a health problem in Khorasan. Recently a new HTLV-I resembling virus has been detected in olive baboon, which suggests this animal as an ideal animal model for therapeutic studies of this disease, for such studies inventing methods and tools to quantify cytokines of this animal, especially IFN-, has high priority. Materials and Methods: Here in, we report methods for isolating cDNA of IFN- from peripheral blood, comparison of its sequence with other primates, construction of competitive plasmids and primers for quantifying this cytokine. In order to standardize the results of quantification, we needed to measure the expression level of a house keeping gene too, so we designed a competitor plasmid and set of primers to quantify the expression of Glycer Aldehyde 3 Phosphate DeHydrogenase (G3PDH) too. Results: Two new cDNA sequences of baboon IFN- and G3PDH were registered in NCBI GENBANK. The competitive PCRs of a sample of this animal measured 7 pg and 0.455 pgof IFN- and G3PDH transcripts respectively. Conclusion: Phylogenetic analysis of IFN- well classified this baboon among old world monkeys, while the structure of this cytokine seems to be same as human. According to the methodology presented here, it is possible to use the ratio of IFN-/G3PDH expression as a tool to compare levels of IFN- production in different samples. |
|
| کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله |
|
|
| نویسندگان مقاله |
کیهان آزادمنش | K. Azadmanesh
فرزین روحوند | F. Roohvand
صفیه امینی | S. Amini
سعید عندلیبی محمودآبادی | S. Andalibi Mahmoodabadi
میرداد کازانجی | M. Kazanji
|
|
| نشانی اینترنتی |
http://hms.gmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-125&slc_lang=fa&sid=1 |
| فایل مقاله |
اشکال در دسترسی به فایل - ./files/site1/rds_journals/2739/article-2739-2201943.doc |
| کد مقاله (doi) |
|
| زبان مقاله منتشر شده |
fa |
| موضوعات مقاله منتشر شده |
پزشکی داخلی |
| نوع مقاله منتشر شده |
پژوهشی |
|
|
|
برگشت به:
صفحه اول پایگاه |
نسخه مرتبط |
نشریه مرتبط |
فهرست نشریات
|