|
|
، جلد ۲۲، شماره ۱، صفحات ۰-۰
|
|
|
| عنوان فارسی |
بیان و تخلیص پروتئین RBD نوترکیب ویروس SARS COV-۲ در سیستم بیانی پروکاریوتی به منظور ارزیابی آنتی بادی IgG موجود در سرم افراد بهبودیافته از بیماری کوید |
|
| چکیده فارسی مقاله |
زمینه و هدف :یکی ازمهمترین پروتئین های ویروسSARS –COV-2 پروتئین S می باشدکه ازدو زیر واحدS1 وS2 تشکیل شده است مهمترین ناحیه در زیرواحدS1 ناحیه اتصال به رسپتور) RBD (است که نقش کلیدی در اتصال به رسپتور های ACE را ایفا می کند RBD یک ناحیه حفاظت شده در پروتئین S می باشدکه هدف سیستم ایمنی و تولیدآنتی بادی برعلیه ویروس می باشد با توجه به اهمیت این ناحیه در تولید آنتی بادی های خنثی کننده می تواند کاندید مناسبی جهت توسعه واکسن و تولید کیت های تشخیص سرولوژی باشدلذا در این مطالعه میزان واکنش آنتی بادی های موجوددر سرم بیماران بهبود یافته از بیماری کوید 19 با استفاده پروتئینRBD نوترکیب تولید شده در سیستم بیانی پروکاریوت به عنوان یک سیستم بیانی ارزان قیمت مورد بررسی قرار گرفتروش بررسی:در این مطالعه سازه نوترکیب PET22b-RBD به میزبان باکتری اشرشیاکلی (BL21)انتقال و سلول های باکتری در محیط کشت داده شدسپس بیان پروتئین با استفاده از ایزوپروپیل بتادی تیوگالاکتوزید(IPTG)القا شد بیان پروتئین نوترکیب RBDبا استفاده ازژل اکریل آمید (SDS-PAGE)و وسترن بلات به تایید نهایی رسید درنهایت پروتئین موردنظر با استفاده از ستون نیکل استخراج گردید و دریک سنجش الیزای غیرمستقیم استفاده شد.یافته ها:در مقایسه با سرم افراد سالم( Cut off: 0.412) افزایش معنی داری در میزان جذب نوری 30 نمونه سرمی به پروتئین RBDنوترکیب مشاهده نشد. نتیجه گیری:پروتئین نوترکیب RBD تولیدشده در میزبان پروکاریوتی واکنش قابل توجهی به آنتی بادی های موجود در سرم بیماران بهبود یافته را از خود نشان نمی دهد و نمیتوان جهت اهداف تشخیصی ازآن استفاده کرد. |
|
| کلیدواژه‌های فارسی مقاله |
کوید 19، سارس کرونا ویروس 2، ناحیه اتصال به رسپتور، |
|
| عنوان انگلیسی |
Expression and Purification of Recombinant SARS COV-2 RBD Protein in Prokaryotic Expression System to Evaluate IgG Antibodies in Serum of People Recovered from Covid 19 |
|
| چکیده انگلیسی مقاله |
Background and objective:One of the most important proteins of SARS-COV-2 virus is S protein, which consists of, S1 and S2 subunits.The most important region in subunit S1 is the receptor binding region (RBD), which plays a key role in binding to ACE receptors.RBD is a conserved region in S protein that is the target of the immune system and the production of antibodies against the virus.Due to the importance of this region in the production of neutralizing antibodies, it can be a good candidate for vaccine development and production of diagnostic kits.Therefore, in this study, the response rate of antibodies in the serum of recovered COVID 19 individuals was evaluated using recombinant RBD protein produced in the prokaryotic expression system as an inexpensive expression system.Method and material:In this study, the recombinant PET22b-RBD construct was transformed to the Escherichia coli (BL21) host and the bacterial cells were cultured in culture medium, then protein expression was induced using isopropyl beta-dithiogalactoside (IPTG).The expression of recombinant RBD protein was confirmed by acrylamide gel (SDS-PAGE) and Western blotting.Finally, the desired protein was extracted using a Ni-NTA column and applied in a indirect ELISA.Result:Compared with the serum of healthy individuals (cut off: 0.412),no significant increase was observed in the response of 30 serum samples to the recombinant RBD protein.، Conclusion: The recombinant RBD protein produced in the prokaryotic host did not respond significantly to the antibodies in the serum of patients recovering from Covid 19 disease and cannot be used for diagnostic purposes. |
|
| کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله |
کوید 19, سارس کرونا ویروس 2, ناحیه اتصال به رسپتور |
|
| نویسندگان مقاله |
فاطمه حسینی |
ویروس شناسی .دانشکده علوم پزشکی .دانشگاه تربیت مدرس. تهران. ایران
طراوت بامداد |
گروه ویروس شناسی دانشکده پزشکی دانشگاه تربیت مدرس
بهرخ فرهمند |
گروه آنفولانزا،انستیتو پاستور، تهران، ایران
کاظم باعثی |
گروه هپاتیت و ایدز، انستیتو پاستور، تهران، ایران
|
|
| نشانی اینترنتی |
https://jsmj.ajums.ac.ir/article_177925_ab6091a209d8ab7c0935523cd6e70a9d.pdf |
| فایل مقاله |
فایلی برای مقاله ذخیره نشده است |
| کد مقاله (doi) |
|
| زبان مقاله منتشر شده |
fa |
| موضوعات مقاله منتشر شده |
|
| نوع مقاله منتشر شده |
|
|
|
|
برگشت به:
صفحه اول پایگاه |
نسخه مرتبط |
نشریه مرتبط |
فهرست نشریات
|