|
|
، جلد ۸، شماره ۳۱، صفحات ۱-۸
|
|
|
| عنوان فارسی |
تهیه یک لیگاند حساس به نور برای گیرنده‌های برادی کنین |
|
| چکیده فارسی مقاله |
چکیده
برادی کنین با اثر بر روی گیرنده های B2 مسئول اکثر اثرات فیزیولوژیکی آن میباشد. تاکنون تهیه یک کونژوگه برادی کنین فعال شونده با نور که میل ترکیبی گیرنده‌های برادی کنین B2 بصورت محلول را داشته باشد گزارش نشده است. با رادیو اکتیو کردن این کونژوگه‌ها میتوان از آنها جهت نشاندار کردن گیرنده‌ها استفاده کرد. گیرنده‌های رادیو اکتیو در مراحل خالص سازی بسیار مفید هستند.
هدف این مطالعه تهیه یک لیگاند برادی کنین فعال شونده با نور است که قابلیت ترکیب با گیرنده‌های برادی کنین B2 را دارد. در این مطالعه تجربی جهت کونژوگاسیون با لایزیل برادی کنین (یکی از آنالوگهای برادی کنین) از Sulfosuccimidy1 (p - azidosalicylamido ) ethyl - 1 , 3 - dithiopropionate ( SASD)-2 استفاده شد. پس از ۱۸ ساعت انکوباسیون SASD با LBKدر نور بی خطر (نور قرمز با لامپ ۲۵ وات) کونژوگه SASD - LBK بدست آمد. آزمایشات HPLC نشان داد که زمان نگهداری کونژوگه در ستون HPLC ۲6دقیقه بود. و این با زمان نگهداری مواد شروع کننده واکنش LBK (۱۷دقیقه) و SASD (24دقیقه) متفاوت بود. همچنین آزمایشات مهار اتصال آنتی بادی علیه برادی کنین به پلیتهای لعاب داده شده با glut - BSA LBK نشان داد که کونژوگه تهیه شده در مقایسه با SASD و LBK فعالیت ایمنولوژیکی خود را حفظ کرده است. آزمایشات پیوند با گیرنده محلول (soluble binding assay) نشان دادند که کونژوگه SASD LBK - با گیرنده‌های برادی کنین B2 در میومتر رحم گاو که بصورت محلول در آمده است میل ترکیبی دارد.
با اضافه کردن I125 به کونژوگه میتوان از آن برای رادیو اکتیو کردن گیرنده استفاده کرد. بدین ترتیب که ابتدا کونژوگه رادیو اکتیو به گیرنده بصورت محلول در آمده متصل میشود، پس از آن با تابیدن نور یک پیوند کووالانسی بین گیرنده و لیکاند ایجاد میشود. بدین ترتیب میتوان مراحل مختلف خالص سازی گیرنده را با دنبال کردن رادیو اکتیویته پیگیری کرد. |
|
| کلیدواژه‌های فارسی مقاله |
برادی کنین /گیرنده‌های برادی کنین |
|
| عنوان انگلیسی |
Preparation of a Photoactivable Ligand for Bradykinin Receptors |
|
| چکیده انگلیسی مقاله |
ABSTRACT
Most of physiological effects of bradykinin is due to its effect on bradykinin B2 receptors. There is no reports of preparation of a photoactivatable analogue of bradykinin reactive with sloubilized bradykinin B2 recpetors. Photoactivatable radioactive ligands are powerful tools in purification of receptors.
In this study we report preparation of a photoactivatable iodinatable analogue of bradykinin reactive with soluble bradykinin B2 receptors. For conjugation with lysyl-bradykinin (LBK) a photoactivatable compound sulfosuccimidyl 2-(pazidosalicylamido ethyl-1,3-dithiopropionate (SASD) was used. Eigtheen hours after incubation in safe light(25 watt red light) LBK-SASD cojugate was prepared. HPLC experiments showed that retention time for conjugate on the HPLC column was 26 minutes. This was different from retention time of starting materials (for LBK 17 and for SASD 24 minutes). Also inhibition studies showed that LBK-SASD conjugate is capable of inhibiting binding of an antibody against bradykinin to ELISA plates coated with LBK-glut-BSA.This shows that in comparison with SASD and LBK the conjugate retained its immunoreactivity. Soluble binding assay showed that the LBK-SASD conjugate is reactive with solubilized bovine uterin myometrium bradykinin B2 receptors.
With the addition of I125 to the conjugate it is possible to radiolabel the receptors. In the first step radioactive conjugate is reacted with the solubilized receptor, then upon exposure of the light a covalent bond is formed between receptor and the ligand. With monitoring the radioactivity it will be possible to check the success of the purification procedures. |
|
| کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله |
Bradykinin / Receptors, Bradykinin |
|
| نویسندگان مقاله |
دکتر بهرام سلطانی | B. Soltani
استادیار گروه فارماکولوژی دانشگاه علوم پزشکی و خدمات بهداشتی درمانی استان گیلان
دکتر چارلز ایی او دییا | CH .E. Odia
استادیار گروه فارماکولوژی دانشکده پزشکی دانشگاه ایندیانا آمریکا
|
|
| نشانی اینترنتی |
http://journal.gums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-310&slc_lang=fa&sid=1 |
| فایل مقاله |
فایلی برای مقاله ذخیره نشده است |
| کد مقاله (doi) |
|
| زبان مقاله منتشر شده |
fa |
| موضوعات مقاله منتشر شده |
تخصصی |
| نوع مقاله منتشر شده |
پژوهشی |
|
|
|
برگشت به:
صفحه اول پایگاه |
نسخه مرتبط |
نشریه مرتبط |
فهرست نشریات
|