|
|
Iranian Journal of Veterinary Medicine، جلد ۱۸، شماره ۴، صفحات ۵۷۹-۵۸۸
|
|
|
| عنوان فارسی |
تشخیص و شناسایی وولباشیا پایپینتیس درعفونت مخفی دیروفیلاریازیس با استفاده از روش
HRM Real-time PCR در سگ های بی صاحب استان های گیلان، مازندران وقزوین |
|
| چکیده فارسی مقاله |
چکیده: زمینه مطالعه: بررسی آلودگی های‌انگلی سگ های ولگرد با توجه به اهمیت بیماری های مشترک قابل انتقال از سگ به انسان حائز اهمیت فراوان است و می تواند تهدیدی برای بهداشت جامعه باشد. ایران یکی از مناطق بومی دیروفیلاریا ایمیتیس است. تست Knott اصلاح شده رایج ترین آزمایش برای تشخیص فیلاریازیس است که اساس آن مشاهده و شناسایی میکروفیلرها در نمونه‌های خون است، اما نتایج این آزمایش در موارد عفونت مخفی بطورکاذب منفی می‌شود. وولباشیا پایپینتیس بعنوان همزیست اجباری دیروفیلاریا ایمیتیس ، نشان دهنده دیروفیلاریازیس درخون سگ است. هدف: مطالعه حاضربا هدف بررسی عفونت مخفی دیروفیلاریا ایمیتیس در سگ های ولگرد استان های گیلان، قزوین و مازندران بر اساس ردیابی دنای وولباشیا پایپینتیس با استفاده از روش ذوب با وضوح بالا (HRM) Real-Time PCR انجام شد. روش کار: تعداد 138 نمونه خون از سگ‌های ولگرد در استان‌های گیلان، مازندران و قزوین جمع‌آوری شد که با دو روش نات اصلاح شده و مولکولی مورد ارزیابی قرار گرفتند. حضور وولباشیا پایپینتیس با تکثیر بخشی از ژن ftsz بطول 267جفت باز بررسی شد. نتایج: نتایج این مطالعه نشان داد که 17.4 درصد از نمونه ها با روش نات اصلاح شده مثبت و 47.8 درصد از نمونه ها با روش مولکولی از نظر آلودگی مثبت بودند. نتایج HRM Real-time PCR نشان داد که دمای ذوب توالی های تکثیر شده ژن سیتوکروم اکسیداز یک برای دیروفیلاریا ایمیتیس (03/0±67/76 درجه سانتیگراد) و آکانتوکیلونما رکوندیتوم (05/0±38/81 درجه سانتی گراد) حاصل شد، دمای ذوب توالی های تکثیر شده ژن ftsz وولباشیا پایپینتیس (80.30°C±0.04°C) بدست آمد که براین اساس روش قابلیت تشخیص تفریقی عفونت را داردو تفاوت در میانگین دماهای ذوب از نظر آماری معنی‌دار بود(05/0p<)، تغییرات دمای ذوب بر اساس تفاوت در توالی‌های نوکلئوتیدها است. نتیجه گیری نهایی: لازم است این نکته مورد توجه قرارگیرد که استفاده از روش های مولکولی برای تشخیص دقیق عفونت مخفی دیروفیلاریازیس ضروری است. آنالیز HRM Real-Time PCR یک مرحله ساده پس ازواکنش زنجیره ای پلیمراز است که از ویژگی های حرارتی قطعات تکثیر شده، برای تشخیص عفونت دیروفیلاریازیس دیروفیلاریازیس بر اساس ردیابی دنای وولباشیا پایپینتیس استفاده می کند. |
|
| کلیدواژه‌های فارسی مقاله |
|
|
| عنوان انگلیسی |
Detecting and Identifying Wolbachia pipientis in Occult Dirofilariasis Using a High-resolution Melting Real-time PCR in Stray Dogs |
|
| چکیده انگلیسی مقاله |
Background: Iran is one of the endemic areas of Dirofilaria immitis. The modified Knott test is the common diagnostic test based on detecting and identifying microfilaria in blood samples. Still, the results may be compromised by D. immitis occult infection (D. immitis infection without microfilariae). Wolbachia pipientis in a dog’s blood is an endosymbiont of D. immitis and an indicator of dirofilariasis.
Objectives: This study aimed to investigate the occult infection of D. immitis in stray dogs in Guilan, Qazvin, and Mazandaran provinces, Iran, based on W. pipientis DNA tracking.
Methods: Blood samples (n=138) were collected, and the presence of W. pipientis was evaluated by amplifying a partial sequence of the FtsZ gene (267 bp).
Results: The results showed that 17.4% of the samples were positive by the modified Knott method, while 47.8% were positive by the molecular methods. The results of high-resolution melting (HRM) real-time PCR showed that the melting temperature of cox1 gene amplicons of D. immitis and Acanthocheilonema reconditum were obtained at 76.67±0.03 °C and 81.38±0.05 °C, respectively as well as it was achieved 80.30±0.04 °C for FtsZ gene of W. pipientis. The results of the present study showed that it is necessary to use molecular methods to diagnose dirofilariasis occult infection accurately.
Conclusion: The HRM real-time PCR analysis is a simple post-PCR step that exploits the thermal characteristics of the amplicons to detect the occult infection of dirofilariasis based on W. pipientis DNA tracking and identification. |
|
| کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله |
Acanthocheilonema reconditum,Dirofilaria immitis,High-resolution melting (HRM) real-time PCR,nematodes,Stray dogs |
|
| نویسندگان مقاله |
Fateme Manshori |
Department of Parasitology, Faculty of Veterinary Medicine, University of Tehran, Tehran, Iran.
Fatemah Jalousian |
parasitology
Seyed Hossein Hosseini |
Department of Parasitology, Faculty of Veterinary Medicine, University of Tehran, Tehran, Iran.
Parviz Shayan |
Departmaent of Parasitology, Faculty of Veterinary Medicine, University of Tehran, Tehran,
Iran
Minoo Soltani |
Rastegar Reference Laboratory, Faculty of Veterinary Medicine, University of Tehran, Tehran, Iran.
|
|
| نشانی اینترنتی |
https://ijvm.ut.ac.ir/article_95124_6a370775c065049ff7dab14410db29a6.pdf |
| فایل مقاله |
فایلی برای مقاله ذخیره نشده است |
| کد مقاله (doi) |
|
| زبان مقاله منتشر شده |
en |
| موضوعات مقاله منتشر شده |
|
| نوع مقاله منتشر شده |
|
|
|
|
برگشت به:
صفحه اول پایگاه |
نسخه مرتبط |
نشریه مرتبط |
فهرست نشریات
|