مجله دانشگاه علوم پزشکی قم، جلد ۹، شماره ۴، صفحات ۲۰-۲۹
عنوان فارسی همسانه‌سازی، امتزاج و بررسی بیان دومن -a۱ آنتی‌ژن حفاظتی (PA۲۰) باسیلوس آنتراسیس و N- ترمینال ipaD شیگلا در اشرشیا کلی
چکیده فارسی مقاله زمینه و هدف: جنس شیگلا یکی از عوامل اصلی بیماری اسهال در انسان و باسیلوس آنتراسیس عامل سیاه‌زخم (یک بیماری مشترک بین انسان و دام) می‌باشد. یکی از مهم‌ترین فاکتورهای بیماریزایی شیگلا، پروتئین IpaD است. همسانه‌سازی N ترمینال ژن ipaD به همراه ژن pa20 که دارای نقش ایمنی‌زایی است، به‌عنوان کاندید واکسن نوترکیب می‌تواند مطرح باشد. در این مطالعه بیان ژن ممزوجی دومن -a1 آنتی‌ژن حفاظتی (PA20) باسیلوس آنتراسیس و N- ترمینال ipaD شیگلا در اشرشیاکلی بررسی شد. روش بررسی : در این مطالعه تجربی، طراحی پرایمر برای ژن‌ pa20 صورت گرفت و جهت تکثیر این قطعه، واکنش PCR انجام شد. سپس قطعه تکثیرشده به درون pGEM-T Easy Vector Systems همسانه‌سازی شد. ژن‌ pa20 به‌وسیله آنزیم‌های محدودالاثر EcoRI و XhoI برش‌خورده و در نهایت، ژن‌ pa20 به ژن ipaD ممزوج شد. وکتور pET28a(+) حاوی کاست ژنی ipaD-pa20 ساخته‌شده به باکتری E. coli سویه BL21(DE3) تراریخت و بررسی بیان کاست ژنی انجام گرفت. یافته‌ها: در این مطالعه، ژن‌های ممزوجی ipaD-pa20 در وکتور بیانی pET28a(+) به‌وسیله PCR و هضم آنزیمی تأیید گردید. همچنین پروتئین نوترکیب تولیدشده به‌وسیله SDS-PAGE و لکه‌گذاری وسترن تأیید شد. نتیجه‌گیری: با توجه به شناسایی آنتی‌ژن PA به‌وسیله آنتی‌بادی PA20 و خاصیت القای آپاپتوز آن و خاصیت ایمنی‌زایی آنتی‌ژن ipaD تولیدشده، به‌عنوان کاندید واکسن نوترکیب علیه انواع شیگلا و باسیلوس آنتراسیس می‌تواند مطرح باشد.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله
عنوان انگلیسی Cloning, Fusion, and Expression of Domain a-1 Protective Antigen (PA20) of Bacillus anthracis and N-Terminal ipaD Gene of Shigella in E. coli
چکیده انگلیسی مقاله Background and Objectives: Genus Shigella is one of the main causes of diarrhea in human and Bacillus anthracis is the cause of anthrax (a zoonotic disease). IpaD protein is one of the most important virulence factors of Shigella . The cloning of N-terminal ipaD gene along with pa20 gene that have a role in immunization, can be considered as a recombinant vaccine candidate. In this study, we investigated the expression of the recombinant protein domain a-1 protective antigen (PA20) of Bacillus anthracis and N-terminal ipaD gene of Shigella in E. coli . Methods: In this experimental study, primers were designed for pa20 gene and PCR was performed to amplify this fragment. Then, the amplified fragment was cloned into pGEM-T Easy Vector Systems. The pa20 gene was cut using restriction enzymes EcoRI and XhoI and finally, pa20 gene was fused to ipaD gene. pET28a (+) Vector containing the gene cassette ipaD-pa20 was prepared and transformed into E. coli strain BL21 (DE3), and the expression of gene cassette was studied. Results: In this study, the ipaD-pa20 fusion genes in the expression vector pET28a(+), were confirmed by PCR and enzyme digestion. Also, the produced recombinant protein were confirmed by SDS-PAGE and Western blotting. Conclusion: Considering the detection of PA antigen by PA20 antibody and its apoptosis induction and immunization property of the produced IpaD antigen, it can be proposed as a recombinant vaccine candidate against types of Shigella and Bacillus anthracis.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله امیرحسین احمدی | amir hossein ahmadi
imam hossein comprehensive university
دانشگاه جامع امام حسین ع
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه جامع امام حسین (Imam hosseyn university)

حسین هنری | hossein honari
imam hossein comprehensive university
دانشگاه جامع امام حسین ع
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه جامع امام حسین (Imam hosseyn university)

محمد ابراهیم مینایی | mohammad ebrahim minaei
imam hossein comprehensive university
دانشگاه جامع امام حسین ع
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه جامع امام حسین (Imam hosseyn university)

نشانی اینترنتی http://journal.muq.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-57&slc_lang=fa&sid=fa
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده مقاله پژوهشی
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات